Genel analiz deneylerinden özel araştırma alanlarına kadar yaygın olarak kullanılabilen OPTIZEN POP, çevre, biyoteknoloji, kimya gibi çeşitli alanlarda güvenilir sonuçlar sağlayarak doğru ölçümü ve mükemmel tekrarlanabilirliği garanti eder. OPTIZEN, bir numunenin ultraviyole ve görünür ışın bantlarındaki her dalga boyunda geçirgenlik veya absorbans değerini ölçer.
Spektroskopi, bir örnekteki atom, molekül veya iyonların, bir enerji düzeyinden diğerine geçişleri sırasında absorplanan veya yayılan elektromanyetik ışımanın ölçülmesi ve yorumlanmasıdır. Elektromanyetik ışıma, uzayda çok büyük hızla hareket eden bir enerji türüdür. Elektromanyetik ışımanın en çok karşılaşılan türleri, gözle algıladığımız görünür ışık ve ısı şeklinde algıladığımız infrared ışınlarıdır.
Elektromanyetik ışıma, hem dalga hem tanecik özelliğine sahiptir. İnterferans (girişim) ve difraksiyon (kırınım)
davranışları dalga özelliğiyle açıklanır. Bir metal yüzeyinden ışıma ile elektronların koparılması (fotoelektrik
olay), ışıma enerjisinin bir madde tarafından absorpsiyonu (soğurulması) ve emisyonu (yayılması) olayları ışımanın
tanecik özelliği (foton) ile açıklanır.
Işımanın absorpsiyonu ve emisyonu
Atomlar, elektromanyetik ışımayı absorbe ederek en düşük
enerji düzeyinden (temel düzey) uyarılmış düzeylere
geçerler; bu geçişlerle ilgili olarak söz konusu atomun
absorpsiyon spektrumları belirlenmiştir.
Elektromanyetik ışımayı absorbe ederek en düşük enerji düzeyinden (temel düzey) uyarılmış düzeylere
geçmiş olan atomlar, temel düzeye dönüş sırasında ultraviyole veya görünür bölge sınırları içinde ışıma
enerjisi yayarlar (emisyon). Her atom için emisyon spektrumu da belirlenmiştir.
Moleküller de atomlarda olduğu gibi uygun enerjideki fotonlarla etkileştiklerinde bu fotonları
absorplayarak uyarılmış hale geçerler. Uyarılmış moleküller, bu kararsız durumdan fazla enerjilerini
yayarak kurtulurlar (moleküler emisyon). Atom spektrumlarından daha karmaşık olan moleküler spektrumlar da belirlenmiştir.
Absorplanan fotonların sayısı, ortamdaki absorpsiyon yapan türlerin sayısı ile orantılıdır. Monokromatik ve I0 şiddetinde
ışıma, ortamı daha küçük olan I şiddetinde terk eder.
Lambert-Beer Kanunu:
Bir çözeltiden geçen ışık miktarı, ışığın çözelti içinde katettiği yol ve çözelti konsantrasyonu ile logaritmik olarak ters orantılı,
emilen ışık miktarı ise doğru orantılıdır.
Transmittans(T)=I/I0
%Transmittans (%T)=100 T
Absorbans (optik dansite, O.D.)= -log10T
Absorbans(A)=ε⋅c ⋅l
c→çözelti konsantrasyonu (mol/L)
l→ışığın çözelti içinde kattetiği yol (cm)
ε→molar absorpsiyon katsayısı(L/mol/cm)
Maddelerin rengi, maddelerin tuttuğu ışının tamamlayıcısıolan ışının rengidir:
Bir maddenin rengi, o maddeden gözümüze ulaşan görünür bölgedeki elektromanyetik ışınlardır.
Bu ışınlar, saydam maddeler için maddenin içinden geçip gelen, saydam olmayanlar için ise yansıyan ışınlardır.
Madde tarafından tutulan ışınların rengi ile maddenin görünür rengini oluşturan ışınların rengi, tamamlayıcı renkler olarak adlandırılır:
Sarı - Mavi
Kırmızı - Yeşil
Işık λ (nm) | Absorbe edilen renk | Görünen renk |
---|---|---|
220-380 | - | - |
380-440 | Menekşe | Sarı - Yeşil |
440-475 | Mavi | Sarı |
475-495 | Yeşil - Mavi | Portakal |
495-505 | Mavi - Yeşil | Kırmızı |
505-555 | Yeşil | Mor |
555-575 | Sarı -Yeşil | Menekşe |
575-600 | Sarı | Mavi |
600-620 | Portakal | Yeşil - Mavi |
620-700 | Kırmızı | Mavi - Yeşil |
Ultraviyole-görünür bölge absorpsiyon spektroskopisinde
Çözelti içindeki madde miktarını çözeltiden geçen veya çözeltinin
tuttuğu ışık miktarından faydalanarak ölçüm işlemine fotometri, bu tip ölçümde kullanılan cihazlara da fotometre denir.
Fotometrikölçümde, renksiz çözeltilerin konsantrasyonu da ölçülebilir.
Analiz edilen örnek üzerine ışık demetinin bir kısmını filtreler kullanarak ayıran ve gönderen aletler kolorimetre
veya fotometre olarak adlandırılırken, yarıklar ya da prizmalar aracılığı ile bu seçiciliği yapan aletler
spektrofotometre olarak adlandırılırlar.
Maddenin ışığı absorplamasını incelemek için kullanılan düzeneğe absorpsiyon spektrometresi veya absorpsiyon
spektrofotometresi adı verilir. Bir spektrofotometre düzeneği, başlıca ışık kaynağı, dalga boyu seçicisi (monokromatör),
dedektörden oluşur; dedektörde elektrik sinyaline çevrilen optik sinyal bir kaydedici veya bir galvanometre ile ölçülür.
Ana bileşenlere ek olarak spektrofotometrede ışığı toplamak, odaklamak, yansıtmak, iki demete bölmek,
ve örnek üzerine belli bir şiddette göndermek amacıyla mercekler, aynalar, ışık bölücüleri, giriş ve
çıkış aralıkları vardır. Örnek, kullanılan dalga boyu bölgesinde ışığı geçiren maddeden yapılmış örnek
kaplarına (küvet) konularak ışık yoluna yerleştirilir.
UV-görünür bölgede D2, W, H2, Xe, civa buhar lambası gibi sürekli ışık kaynakları kullanılır.
Tungsten flaman lambası, görünür ve yakın IR bölgede (320-3000 nm) ışık yayar. Tungsten lambasının içinde bir miktar iyot veya
brom buharı bulunursa lambanın ömrü artar ve bu lamba tungsten-halojen lambası olarak adlandırılır.
Ulraviyole bölgede en çok kullanılan lambalar, hidrojen ve döteryum elektriksel boşalım lambalarıdır.
Bu lambalar 180-380 nm arasında ışık yayar. Daha pahalı ve daha uzun ömürlü olan D2 lambasının yaydığı
ışığın şiddeti H2 lambasına göre çok daha fazladır.
Xe ark lambası,UV-görünür bölgenin tümünde (150-700 nm) kullanılabilecek şiddetli ve sürekli ışık kaynağıdır.
Civa buhar lambası,her iki bölgede ışıma yapabilen bir ışık kaynağıdır; sürekli spektruma ek olarak kesikli hatlar da içerir.
Dalga boyu seçicileri (monokromatörler), ışık kaynağından gelen polikromatik ışıktan tek bir dalga boyunda monokromatik
ışık elde edilmesini gerçekleştiren düzeneklerdir.
Monokromatör, filtreli fotometrelerde ışık filtresidir; spektrofotometrelerde ise ışık prizmasıdır.
Örnek üzerine gönderilen ışığın daha monokromatik olmasını sağlamak için bazı spektrofotometrelerde çift monokromatör kullanılır.
Işık filtreleri,camdan yapılmışve uygun boyalarla boyanmış filtrelerdir. Portatif olup kullanıcı istediği zaman uygun
dalga boyundaki filtreyi cihaza takar. Filtrelerin üzerinde geçirdikleri dalga boyu yazılıdır. Filtrenin rengi,
ölçüm yapılacak çözeltinin rengine göre seçilir; örneğin, mavi ışığıtutan (sarı) bir maddenin ölçümünde sadece mavi
ışığı geçiren filtre kullanılır.
Işık prizmaları,cam veya kuartz olabilir. Özellikle düşük UV ışınları iyi geçirmediğinden cam prizma görünür bölge için uygundur.
Kuartz prizmalar ise hem UV ışınlarını iyi geçirir, hem de görünür ışık ve IR’e yakın bölgelerde çalışmaya elverişlidir.
Kuartz prizmalar pahalı spektrofotometrelerde bulunur.
Spektrofotometrelerde dedektör, maddenin ışığı absorplayıp absorplamadığını anlamak için ışık kaynağından gelen ışığın şiddetinin
ölçülmesi amacıyla kullanılan düzenektir. UV-görünür bölgede kullanılabilen üç tür dedektör vardır.
Fotovoltaik, Fototüp ve Fotoçoğaltıcı tüp dedektörler.
Spektrofotometre ile bir maddenin nicel analizinin yapılacağıdalga boyunu kararlaştırmak için,
örneğin absorpsiyon spektrumunu bilmek gerekir. Bunun için, maddenin 1 molar çözeltisinin çeşitli
dalga boylarındaki absorbans değerleri ölçülür.
Çözücünün ve çözeltide bulunan başka türlerin ışığı absorplamadığı, Lambert-Beer eşitliğine uyulduğu
ve nicel analizin en duyarlı bir biçimde yapılabileceği dalga boyu değeri saptandıktan sonra analizi
yapılacak maddeyi içeren ve derişimleri bilinen bir dizi standart çözelti ile bu dalga boyundaki absorbans (A)
değerleri ölçülür. A değerleri, standart çözeltilerin bilinen derişimlerine karşı grafiğe geçirilir.